کیت اندازه گیری پروتئین

آشنایی با کیت اندازه گیری پروتئین
اندازه گیری میزان پروتئین در آزمایشگاه های زیادی همچون زیست شناسی و ژنتیک کاربرد پیدا می کند. برای این کار روش های متعددی وجود دارد اما یکی از آسان ترین آنها استفاده از کیت اندازه گیری پروتئین است که با استفاده از آن می توان پروتئین را استخراج کرده و میزان آن را اندازه گیری کرد.
کیت های اندازه گیری پروتئین از روش های مختلفی همچون ستون تخلیص، روش لوری یا روش برادفورد برای سنجش پروتئین استفاده می کنند. هر کدام از این کیت ها را می توان بنا به نوع نمونه، حساسیت روش و ماده مورد نظر انتخاب کرد.
کیت اندازه گیری پروتئین به روش برادفورد
اندازه گیری پروتئین به روش برادفورد از روش های سریع و دقیق در اندازه گیری غلظت پروتئین است. با استفاده از این کیت می توان پروتئین های مختلف در نمونه هایی همچون سرم، پلاسما و بافت های جانوری را اندازه گیری کرد.
اندازه گیری پروتئین به روش برادفورد بر اساس اصول رنگ سنجی انجام می شود به نحوی که پروتئین در اثر تماس با رنگ آبی کوماسی، تشکیل کمپلکس داده و منجر به تغییر رنگ این ماده به قهوه ای می شود.
درون کیت اندازه گیری به روش برادفورد محلول Nadford Reagent به عنوان معرف و محلول Stabilizer برای آماده سازی نمونه قرار دارد.
کیت اندازه گیری پروتئین
روش کار با کیت اندازه گیری پروتئین
برای شروع اندازه گیری ابتدا باید محلول های مورد نظر را آماده کرد. برای این کار معرف نادفورد را با آب دیونیزه به نسبت 1 به 5 مخلوط کنید. در ادامه به ویال استاندارد حاوی پودر 1 میلی لیتر آب دیونزه اضافه کنید تا پودر کامل حل شود. برای آماده سازی نمونه آن را به نسبت 1 به 1 با معرف Stabilizer مخلوط کنید.
برای انجام آزمایش 5 میکرولیتر از هر نمونه را به پیلت اضافه کرده و سپس 250 میکرولیتر از محلول نادفورد را به هر یک اضافه کنید. در ادامه برای دریافت نتایج نمونه را در دستگاه میکروپلیت ریدر آنالیز کنید.
کیت اندازه گیری پروتئین به روش لوری
یکی از متداول ترین راه های اندازه گیری غلظت پروتئین استفاده از کیت های اندازه گیری پروتئین به روش لوری است. در این روش پروتئین موجود در نمونه را در یک محیط قلیایی قرار می دهیم تا در اثر واکنش با سولفات مس و تارتارات تشکیل کمپلکس دهد. سپس کمپلکس تشکیل شده با معرف فولین واکنش داده و با احیای آن رنگ آبی تیره ای را ایجاد می کند.
غلظت پروتئین در این روش با استفاده از یک پروتئین استاندارد به نام BSA تعیین می شود به نحوی که با ترسیم منحنی حاصل از غلظت نمونه و مقایسه آن با منحنی استاندارد، غلظت پروتئین مجهول محاسبه می شود.
کیت اندازه گیری پروتئین
تعیین کمی میزان پروتئین با کیت BCA
یکی از روش های ساده برای سنجش کمی پروتئین در محلول ها استفاده از کیت BCA است. در این روش پروتئین باعث احیا نمک مس و تبدیل آن به یون می شود. یون مس در ادامه با معرف واکنش داده و تشکیل کمپلکس رنگی می دهد.
مقدار کمپلکس تشکیل شده با مقدار پروتئین موجود در محلول متناسب است بنابراین با اندازه گیری مقدار آن می توان مقدار پروتئین را اندازه گیری کرد.
هلدینگ KTG
متشکل از سه شرکت:
کیمیا طب گستر – فروش تجهیزات کلینیکال
کیمیا تجهیز غرب – فروش تجهیزات آزمایشگاهی
کیمیا تجهیز سکو – طراحی و فضا سازی آزمایشگاهی
هلدینگ KTG با دیدگاه نوین One-stop labratory shop و با هدف ایجاد اعتماد و سیاست های بلند مدت در زمینه واردات و تولید و توزیع کالاهای شیمیائی آزمایشگاهی از قبیل تجهیزات آزمایشگاهی، مواد آزمایشگاهی، لوازم مصرفی، ابزار سنجش، ظروف شیشه ای و پلاستیکی آزمایشگاهی، تجهیزات ایمنی در آزمایشگاه و طراحی و فضا سازی آزمایشگاه های کشور از سال 1375 سرمایه گذاری شده است